Βιολογία Θετικών Σπουδών Γ' Λυκείου

302 / 350

301
Βιολογία Θετικών Σπουδών – Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ
Σημ.: Το παραπάνω πλασμίδιο αποτελέι μάλλον φορέα έκφρασης και όχι
φορέα κλωνοποίησης. Οι φορείς έκφρασης, σε αντίθεση με τους φορείς
κλωνοποίησης, περιέχουν υποκινητές και ρυθμιστικές περιοχές για την
αποδοτική μεταγραφή των γονιδίων που εισάγονται και την μετάφρασή τους
σε πρωτεϊνες. Για το λόγο αυτό απορρίπτεται η ενδονουκλεάση γ, καθώς κόβει
στον επιλεγμένο υποκινητή του πλασμιδίου. Αν βέβαια ο συγκεκριμένος
υποκινητής αφορά σε κάποιο άλλο, τυχαίο, γονίδιο του πλασμιδίου, τότε δεν
θα είχαμε κάποιο λόγο να απορρίψουμε τη χρήση της περιοριστικής
ενδονουκλεάσης γ.
Δ2..Κατά τη διαδικασία κλωνοποίησης του ανασυνδυασμένου DNA υπάρχει και
το στάδιο επιλογής των κυττάρων-ξενιστών που έχουν προσλάβει το
ανασυνδυασμένο (ή μη) πλασμίδιο από εκείνα που δεν το έχουν προσλάβει.
Γενικά τα βακτήρια - ξενιστές δέχονται σε μικρό ποσοστό πλασμίδια, μερικά
από τα οποία είναι ανασυνδυασμένα, ενώ άλλα όχι. Συνήθως
χρησιμοποιούνται ως ξενιστές, βακτήρια που δεν έχουν πλασμίδια και
επομένως είναι ευαίσθητα σε αντιβιοτικά. Η επιλογή των βακτηρίων που
δέχτηκαν ανασυνδυασμένο ή μη πλασμίδιο στηρίζεται στην ικανότητα
ανάπτυξής τους παρουσία αντιβιοτικού, επειδή το ανασυνδυασμένο
πλασμίδιο περιέχει ένα ή περισσότερα γονίδια που τους προσδίδουν
ανθεκτικότητα στα συγκεκριμένα αντιβιοτικά. Έτσι, τα μετασχηματισμένα (με
ανασυνδυασμένο ή μη ανασυνδυασμένο πλασμίδιο) βακτήρια όπως και αυτά
που δεν έχουν δεχθεί πλασμίδιο αναπτύσσονται σε ένα επόμενο στάδιο σε
στερεό θρεπτικό υλικό στο οποίο έχουν προστεθεί και τα αντιβιοτικά
στρεπτομυκίνη και αμπικιλίνη (ένα μόνο ή συνδυασμός και των δύο). Κάθε
βακτήριο που προσέλαβε ένα μόνο πλασμίδιο (ανασυνδυασμένο ή μη)
πολλαπλασιάζεται και παράγει μια αποικία που αποτελεί έναν βακτηριακό
κλώνο καθώς θα εμφανίζει ανθεκτικότητα στα παραπάνω αντιβιοτικά, ενώ
αντίθετα τα βακτήρια που δεν προσέλαβαν πλασμίδιο, δεν παρουσιάζουν
ανθεκτικότητα στα αντιβιοτικά αυτά και έτσι δεν επιβιώνουν.
Δ3. Γνωρίζουμε ότι τόσο η κωδική αλυσίδα του DNA όσο και το mRNA, είναι
συμπληρωματικά προς τη μεταγραφόμενη αλυσίδα του DNA. Έτσι, η μόνη τους
διαφορά είναι ότι όπου στην κωδική αλυσίδα υπάρχει Τ στο mRNA υπάρχει U.
Εφόσον το κωδικόνιο έναρξης του mRNA είναι το AUG με κατεύθυνση 5’AUG
3’, το αντίστοιχο κωδικόνιο στην κωδική αλυσίδα του DNA θα είναι το ATG και
θα έχει κατεύθυνση 5’ ATG 3’. Επίσης, εφόσον τα κωδικόνια λήξης του mRNA
είναι τα 5’ UAG 3’ ή 5’ UGA 3’ ή 5’ UAA 3’, τα αντίστοιχα κωδικόνια στην
κωδική αλυσίδα του DNA θα είναι τα 5’ ΤAG 3’ ή 5’ ΤGA 3’ ή 5’ ΤAA 3’. Τέλος, οι
βάσεις ανάμεσα στο κωδικόνιο έναρξης και το κωδικόνιο λήξης θα πρέπει να
διαβάζονται ανά τριάδες (κώδικας τριπλέτας), συνεχόμενα χωρίς να