301 / 350
300
Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ – Βιολογία Θετικών Σπουδών
Δ1.
Ποια από τις περιοριστικές ενδονουκλεάσες
α, β, γ
ή
δ
είναι η κατάλληλη
για
τη χρήση του πλασμιδίου αυτού ως φορέα κλωνοποίησης; (μονάδα 1)
Να αιτιολογήσετε την απάντησή σας. (μονάδες 3)
(
Μονάδες 4
)
Δ2.
Με ποιον τρόπο μπορούμε να επιλέξουμε τους βακτηριακούς κλώνους που
έχουν προσλάβει πλασμίδιο (ανασυνδυασμένο ή μη) από τους κλώνους που
δεν έχουν προσλάβει πλασμίδιο; Να αιτιολογήσετε την απάντησή σας.
(
Μονάδες 3
)
Στην
Εικόνα 2
δίνεται τμήμα DNA το οποίο περιέχει το συνεχές ανθρώπινο
γονίδιο που επιθυμούμε να εισαγάγουμε στο πλασμίδιο της
Εικόνας 1
.
Εικόνα 2
Δ3.
Να εντοπίσετε την κωδική αλυσίδα του γονιδίου της
Εικόνας 2
. (μονάδα 1)
Να γράψετε το mRNA και να σημειώσετε τον προσανατολισμό του.
(μονάδες 2) Nα αιτιολογήσετε την απάντησή σας. (μονάδες 4)
(
Μονάδες 7
)
Δ4.
Σύμφωνα με την
Εικόνα 2
, να γράψετε την αλληλουχία μήκους έξι ζευγών
βάσεων που αναγνωρίζει η περιοριστική ενδονουκλεάση, την οποία
προσδιορίσατε στο ερώτημα Δ1, για την κλωνοποίηση του γονιδίου.
(
Μονάδες 5
)
Δ5.
.
Να εξηγήσετε γιατί η κλωνοποίηση του γονιδίου της
Εικόνας 2
στο
πλασμίδιο της
Εικόνας 1
μπορεί να οδηγήσει
i) στη δημιουργία βακτηριακών κλώνων που παράγουν το ολιγοπεπτίδιο
και
ii)
.
στη δημιουργία βακτηριακών κλώνων που δεν παράγουν το
.
ολιγοπεπτίδιο παρόλο που περιέχουν το ανασυνδυασμένο πλασμίδιο.
(
Μονάδες 6
)
Απάντηση:
Δ1.
Γνωρίζουμε
ότι η περιοριστική ενδονουκλεάση θα πρέπει να έχει μία θέση
αναγνώρισης στο φορέα κλωνοποίησης. Έτσι, από τη στιγμή που οι
περιοριστικές ενδονουκλεάσες α και β έχουν δύο θέσεις αναγνώρισης στο
πλασμίδιο, δεν είναι οι κατάλληλες για τη χρήση του πλασμιδίου
αυτού ως
φορέα κλωνοποίησης. Επίσης η περιοριστική ενδονουκλεάση γ απορρίπτεται
από τη στιγμή που κόβει το πλασμίδιο μέσα στον υποκινητή, κάτι που θα
επηρεάσει τη μεταγραφή του γονιδίου (αφού τα βακτήρια έχουν όλους τους
μεταγραφικούς παράγοντες που απαιτούνται για τη μεταγραφή του γονίδιου).
Επομένως, κατάλληλη περιοριστική ενδονουκλεάση είναι η δ, καθώς έχει μία
θέση αναγνώρισης στο φορέα κλωνοποίησης και δεν κόβει μέσα σε κάποια
σημαντική αλληλουχία του πλασμιδίου.