343
Βιολογία Θετικών Σπουδών –
Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ
κέντρο ή κοντά σε αυτό, με αποτέλεσμα να ελαττωθεί ή και να
μηδενισθεί η
ενεργότητα του.
Γ3.
Μετά τη δράση της περιοριστικής ενδονουκλεάσης θα προκύψουν 2 τμήματα
δίκλωνου
DNA
. Εφόσον η περιοριστική ενδονουκλεάση κόβει κάθε αλυσίδα
μεταξύ του C και του G με κατεύθυνση 5΄
Ѝ
3΄, τότε θα έχουμε:
5΄
TTGTCC CGGGAACAT
3΄
3΄
AACAGGGCCCTTGTA
5΄
Οπότε τα δύο τμήματα που θα προκύψουν θα είναι:
5΄
TTGTCCC
3΄ και
5΄
GGGAACAT
3΄
3΄
AACAGGG
5΄
3΄
CCC TTGTA
5΄
Γ4.
Τα
διαφορετικά
είδη DNA, του πλασμιδίου και τα τμήματα του γονιδίου
,
αναμιγνύονται και
ενώνονται μεταξύ τους με τη
μεσολάβηση
ενός ενζύμου,
της DNA δεσμάσης, η οποία καταλύει το σχηματισμό 3 – 5 φωσφοδιεστερικών
δεσμών. Θα προκύψουν 4 ανασυνδυασμένα πλασμίδια. Αυτό γιατί το κάθε
ένα από τα 2 τμήματα που προκύπτουν μετά την επίδραση της περιοριστικής
ενδονουκλεάσης, μπορούν να εισαχθούν στο πλασμίδιο είτε όπως είναι είτε
ανεστραμμένα. Δηλαδή:
1
ο
ανασυνδυασμένο μόριο
DNA:
2
ο
ανασυνδυασμένο μόριο
DNA:
5΄
TTGTCCC
3΄
3΄
AACAGGG
5΄
5΄
GGGACAA
3΄
3΄
C C C TGT T
5΄