Βιολογία Θετικών Σπουδών Γ' Λυκείου

121

Βιολογία Θετικών Σπουδών – Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ

3’ CUUAAGAG 5’

3’ AUCGAAUU 5’

CAACTTAAGAATCGAATTCAGCCCGTACTTAAGAG

5’ GUUGAAUU 3’

5’

3’

συνεχής αλυσίδα

ασυνεχής αλυσίδα

DNA ελικάσες

διχάλα αντιγραφής

GTTGAATTCTTAGCTTAAGTCGGGCATGAATTCTC

5’

έχουν την ικανότητα να αρχίσουν την αντιγραφή, το κύτταρο έχει ένα ειδικό

σύμπλοκο που αποτελείται από πολλά ένζυμα, το πριμόσωμα, το οποίο

συνθέτει στις θέσεις έναρξης της αντιγραφής μικρά τμήματα RNA,

συμπληρωματικά προς τις μητρικές αλυσίδες, τα οποία ονομάζονται

πρωταρχικά τμήματα. Αφού η αντιγραφή γίνεται με φορά 5’

3’ και το

πρωταρχικό τμήμα τοποθετείται στη θέση έναρξης της αντιγραφής, συνεπώς

και αυτό θα έχει κατεύθυνση 5’

3’. Τα πρωταρχικά τμήματα (i) και (ii) έχουν

συμπληρωματικές αλληλουχίες στην 1

αλυσίδα ενώ στη 2

αλυσίδα υπάρχει

μόνο μία συμπληρωματική αλληλουχία πρωταρχικού τμήματος (iii), έτσι

συμπεραίνουμε ότι η 1

αλυσίδα αντιγράφεται με ασυνεχή και η 2

αλυσίδα με

συνεχή τρόπο.

Δ3.

Οι περιοριστικές ενδονουκλεάσες παράγονται από βακτήρια και ο

φυσιολογικός τους ρόλος είναι να τα προστατεύουν από την εισβολή «ξένου»

DNA. Οι περιοριστικές ενδονουκλεάσες αναγνωρίζουν ειδικές αλληλουχίες 4-8

νουκλεοτιδίων στο δίκλωνο DNA. Μία από τις περιοριστικές ενδονουκλεάσες

που χρησιμοποιείται ευρέως είναι η EcoRI που απομονώθηκε από το βακτήριο

Escherichia coli.

Το ένζυμο αυτό όποτε συναντά την αλληλουχία

5'-G Α Α Τ Τ C-3'

3'-C Τ Τ A A G-5'

στο γονιδίωμα, κόβει κάθε αλυσίδα μεταξύ του G και του Α (με κατεύθυνση

3') αφήνοντας μονόκλωνα άκρα από αζευγάρωτες βάσεις στα κομμένα

άκρα.

Θα επιλέξουμε το πλασμίδιο Α γιατί εκεί μόνο υπάρχει η αλληλουχία

5’GAATTC 3’ με την κατάλληλη κατεύθυνση 5' → 3'.

Επειδή η EcoRI κόβει κάθε αλυσίδα μεταξύ του G και του Α σπάζοντας 1

φωσφοδιεστερικό δεσμό (φ.δ.), συνολικά θα διασπαστούν 2 φ.δ. στο