187 / 350
186
Εκδόσεις ΜΠΑΧΑΡΑΚΗ – Βιολογία Θετικών Σπουδών
Γ3.
Στο σχήμα 3 απεικονίζεται πλασμίδιο που διαθέτει γονίδια ανθεκτικότητας σε
δύο αντιβιοτικά, την αμπικιλίνη και τετρακυκλίνη και αναγράφονται
εσωτερικές αλληλουχίες των δύο γονιδίων ανθεκτικότητας. Αφού το πλασμίδιο
κοπεί με την EcoRI και εισαχθεί ένα γονίδιο ξένου οργανισμού σε αυτό να
εξηγήσετε ποιο από τα δύο αντιβιοτικά θα χρησιμοποιούσατε για τη διάκριση
των μετασχηματισμένων βακτηριακών κλώνων με ανασυνδυασμένο
πλασμίδιο.
(Μονάδες 5)
Απάντηση:
Γ1.
Το είδος του βιβλιοθήκης με το οποίο θα εργαστούμε είναι η γονιδιωματική
βιβλιοθήκη. Αυτό γιατί η γονιδιωματική βιβλιοθήκη περιέχει το συνολικό DNA
του οργανισμού δότη. Αντίθετα οι cDNA βιβλιοθήκες περιέχουν αντίγραφα των
mRNA όλων των γονιδίων που εκφράζονται στα κύτταρα αυτά και έχουν το
πλεονέκτημα απομόνωσης μόνο των αλληλουχιών των γονιδίων που
μεταφράζονται σε αμινοξέα, δηλαδή των εξωνίων.
Γνωρίζουμε ότι τα γονίδια που μεταγράφονται σε tRNA μεταγράφονται αλλά
δε μεταφράζονται. Συνεπώς τα ευκαρυωτικά γονίδια που μεταγράφονται σε
tRNA μπορούν να εντοπιστούν μόνο στη γονιδιωματική βιβλιοθήκη και όχι στη
cDNA.
Γ2.
Γνωρίζουμε ότι τα αντικωδικόνια των tRNA είναι συμπληρωματικά και
αντιπαράλληλα των κωδικονίων του mRNA. Το κωδικόνιο λήξης δεν
κωδικοποιεί κανένα αμινοξύ και δεν έχει αντίστοιχο αντικωδικόνιο.
Επομένως το αντικωδικόνιο 3΄ CCC 5΄ θα προσδεθεί στο κωδικόνιο του mRNA
5΄ GGG 3΄ που κωδικοποιεί τη γλυκίνη, ενώ το τροποποιημένο αντικωδικόνιο
3΄ ΑCC 5΄ θα προσδεθεί στο κωδικόνιο του mRNA 5΄ UGG 3΄. Το
τροποποιημένο tRNA εξακολουθεί να μεταφέρει το αμινοξύ γλυκίνη, εφόσον
το μόνο που άλλαξε είναι η περιοχή του αντικωδικονίου.